Das Grundprinzip der Elektrophorese

Elektrophorese

Die Grund Prinzip der Elektrophorese

Elektrophorese bezieht sich auf das Verfahren der geladenen Teilchen wandern in einem elektrischen Feld. Viele wichtige biologische Moleküle, wie beispielsweise Aminosäuren, Peptide, Proteine, Nukleotide, Nukleinsäuren und so mit ionisierbaren Gruppen, so können sie positiv oder negativ zu einem bestimmten pH-Wert unter der Wirkung des elektrischen Feldes aufgeladen wird, das aufgeladene brachte seine Moleküle bewegen in die Richtung Gegenelektrode Ladungspolarität. Elektrophorese-Technik ist die Verwendung in dem elektrischen Feld, das Molekül selbst, und die Differenz in Bezug auf Größe, Form und andere Eigenschaften der einzelnen Moleküle, die in den Ladungseigenschaften der Probe abgetrennt werden, wobei die geladenen Moleküle haben unterschiedliche Wanderungsraten und somit die Proben wurden isoliert, identifiziert und gereinigt Technologie.

Elektrophorese-Prozess muss in einem Trägermedium durchgeführt werden. Tiselius et al. 1937 freie Schnittstelle Elektrophorese keine feste Trägermedium, so dass die Diffusion und Konvektion als die starke Wirkung der Trennung. So gibt es eine feste Trägermedium der Elektrophorese wurde die Probe einer Elektrophorese-Prozess in einem festen Medium unterzogen, wodurch die Störwirkung Diffusion und Konvektion. Die erste Unterstützung Medium Papier und Celluloseacetat-Membranen, die derzeit diese Medien im Labor hat weniger angewendet. Für einen langen Zeitraum, kleinen Molekülen, wie Aminosäuren, Peptiden, Zuckern oder dergleichen wird in der Regel mit einem Filterpapier aus Cellulose, Kieselgel-Dünnschichtplatte für elektrophoretische Trennmedium, Analysen durchgeführt, jedoch wird im allgemeinen unter Verwendung empfindlicher Techniken wie HPLC und dergleichen analysiert. Diese Medien geeignet zur Trennung von kleinen Molekülen, einfach und bequem. Aber für die Trennung komplexer biologischer Makromoleküle weniger wirksam. Gel als stark förderte die Entwicklung von Elektrophorese-Technologie eingeführt Trägermediums wurde die Technologie zu einem wichtigen Mittel für die elektrophoretische Analyse von Proteinen, Nukleinsäuren und anderen biologischen Makromolekülen. Gel zunächst mit Stärke-Gel, aber am häufigsten verwendete Agarose-Gel und Polyacrylamid-Gel. Proteine ​​mittels Polyacrylamid-Gelelektrophorese-Dur.

Elektrophoresevorrichtung besteht aus zwei Teilen: Die Stromversorgung und die Elektrophoresekammer. Gleichstromversorgung, zum Erzeugen eines elektrischen Feldes angetrieben Wanderung von geladenen Molekülen in der Elektrophorese-Kammer. Elektrophoresetank kann in horizontalen und vertikalen Kategorien eingeteilt werden. Vertikale Platte Elektrophorese ist eine allgemeinere Form, üblicherweise in Polyacrylamid-Gelelektrophorese der Proteintrennung verwendet. Zwischen Elektrophoresetank zusammengeklemmt wird, wobei die beiden Glasplatten, Glasplatten, die durch einen Streifen getrennt auf beiden Seiten, in der Mitte der Glasplatte in der Gelelektrophorese hergestellt werden, ist das Gel Größe typischerweise 12cm & amp; acute; 14 cm, einer Dicke von 1 mm ca. 2 mm, in den letzten Jahren neu entwickelten Elektrophoresetank, Kunststoffoberfläche ist kleiner, dünner, kürzer Elektrophorese Reagenzien und zu speichern time.When Sie setzen Klebstoff in einer Kunststoff-Kamm-Gel-Lösung, nach dem Entfernen der Gummi Polymerisation, Ausbilden einer Nut auf der Probe. Horizontal-Elektrophorese, das Gel, die auf das horizontale Glas- oder Plastikplatte mit einer dünnen Schicht von feuchtem Filterpapier verbunden Gelelektrophoresepuffer, oder direkt in der gel-Puffer eingetaucht. Da das Ändern des pH der geladenen Moleküle bewirken eine Änderung der Ladung, wodurch seine elektrophoretische Wanderungsgeschwindigkeit zu beeinflussen, so dass die Elektrophorese Prozess in einem geeigneten Puffer durchgeführt werden, der Puffer halten kann stabile Ladungseigenschaften Isolat sein.