O princípio básico de electroforese
naky
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2014-12-09 20:22:34
Eletroforese
O básico princípio da eletroforese
Electroforese refere-se ao processo de as partículas carregadas migrar num campo eléctrico. Muitas moléculas biológicas importantes, tais como aminoácidos, péptidos, proteínas, nucleótidos, ácidos nucleicos e assim possuindo grupos ionizáveis, eles podem ser carregados positiva ou negativamente a um pH específico, sob a acção do campo eléctrico, o cobrado trazido suas moléculas se movem na direção polaridade de carga do eléctrodo oposto. Electroforese técnica é o uso no campo eléctrico, a própria molécula e a diferença devido ao tamanho, forma, e outras propriedades das várias moléculas a serem separadas nas propriedades de carga da amostra, as moléculas carregadas têm diferentes velocidades de migração, e assim as amostras foram isoladas, identificadas ou tecnologia purificado.
Processo de Eletroforese deve ser realizada num meio de suporte. Tiselius et al. 1937 eletroforese de interface livre realizado no meio fixo de apoio, de modo a difusão e convecção do que o forte impacto da separação. Portanto, há um meio de suporte fixo de electroforese, a amostra foi submetida a electroforese num processo de forma fixa, reduzindo a difusão e convecção efeito de interferência. Médio suporte inicial é membranas de papel e de acetato de celulose, atualmente essas mídias em laboratório tem sido aplicado menos. Durante um longo período de tempo, as moléculas pequenas, tais como aminoácidos, péptidos, açúcares ou similares, é geralmente levada a cabo usando um papel de filtro de celulose, placa de gel de sílica de camada fina para meio de separação electroforética, análise, mas é geralmente utilizando técnicas mais sensíveis tais como HPLC e semelhantes analisados. Estes meios adequados para a separação de moléculas pequenas, simples e convenientes. Mas, para a separação de macromoléculas biológicas complexas menos eficaz. Gel como meio de apoio introduzido muito promoveu o desenvolvimento da tecnologia de electroforese, a tecnologia tornou-se um importante meio de análise electroforética de proteínas, ácidos nucleicos e outras macromoléculas biológicas. Gel inicialmente utilizando gel de amido, mas mais utilizado em gel de agarose e gel de poliacrilamida. Proteínas utilizando eletroforese em gel de poliacrilamida major.
Aparelho de electroforese é constituído por duas peças: A fonte de alimentação e o tanque de eletroforese. Fonte de alimentação DC, gerando um campo elétrico dirigido migração de moléculas carregadas no tanque de eletroforese. Tanque de electroforese podem ser divididos em categorias horizontais e verticais. Eletroforese de placa Vertical é uma forma mais comum, comumente usado em eletroforese em gel de poliacrilamida de separação das proteínas. Intermediário tanque de electroforese é apertado em conjunto, as duas folhas de vidro, placas de vidro separadas por uma tira em ambos os lados, no meio da placa de vidro preparada em electroforese em gel, o tamanho do gel é tipicamente 12 centímetros & amp; aguda; 14 cm, espessura de 1mm ~ 2 mm, nos últimos anos, tanque de eletroforese recém-desenvolvido, superfície de plástico é menor, mais fino, mais curtos reagentes eletroforese e salvar time.When você colocar cola em uma solução de gel pente de plástico, após a remoção da borracha a polimerização, a formação de uma ranhura na amostra. Electroforese horizontal, o que coloca em gel horizontal de vidro ou a placa de plástico, com uma fina camada de papel de filtro húmido e tampão de electroforese em gel de ligado, ou directamente imerso no tampão do gel. Porque mudando o pH de moléculas carregadas causar uma mudança na carga, o que afecta a sua velocidade de migração electroforética, de modo que o processo de electroforese para ser levada a cabo num tampão adequado, o tampão de carga pode manter estável propriedades de ser isolado.
O básico princípio da eletroforese
Electroforese refere-se ao processo de as partículas carregadas migrar num campo eléctrico. Muitas moléculas biológicas importantes, tais como aminoácidos, péptidos, proteínas, nucleótidos, ácidos nucleicos e assim possuindo grupos ionizáveis, eles podem ser carregados positiva ou negativamente a um pH específico, sob a acção do campo eléctrico, o cobrado trazido suas moléculas se movem na direção polaridade de carga do eléctrodo oposto. Electroforese técnica é o uso no campo eléctrico, a própria molécula e a diferença devido ao tamanho, forma, e outras propriedades das várias moléculas a serem separadas nas propriedades de carga da amostra, as moléculas carregadas têm diferentes velocidades de migração, e assim as amostras foram isoladas, identificadas ou tecnologia purificado.
Processo de Eletroforese deve ser realizada num meio de suporte. Tiselius et al. 1937 eletroforese de interface livre realizado no meio fixo de apoio, de modo a difusão e convecção do que o forte impacto da separação. Portanto, há um meio de suporte fixo de electroforese, a amostra foi submetida a electroforese num processo de forma fixa, reduzindo a difusão e convecção efeito de interferência. Médio suporte inicial é membranas de papel e de acetato de celulose, atualmente essas mídias em laboratório tem sido aplicado menos. Durante um longo período de tempo, as moléculas pequenas, tais como aminoácidos, péptidos, açúcares ou similares, é geralmente levada a cabo usando um papel de filtro de celulose, placa de gel de sílica de camada fina para meio de separação electroforética, análise, mas é geralmente utilizando técnicas mais sensíveis tais como HPLC e semelhantes analisados. Estes meios adequados para a separação de moléculas pequenas, simples e convenientes. Mas, para a separação de macromoléculas biológicas complexas menos eficaz. Gel como meio de apoio introduzido muito promoveu o desenvolvimento da tecnologia de electroforese, a tecnologia tornou-se um importante meio de análise electroforética de proteínas, ácidos nucleicos e outras macromoléculas biológicas. Gel inicialmente utilizando gel de amido, mas mais utilizado em gel de agarose e gel de poliacrilamida. Proteínas utilizando eletroforese em gel de poliacrilamida major.
Aparelho de electroforese é constituído por duas peças: A fonte de alimentação e o tanque de eletroforese. Fonte de alimentação DC, gerando um campo elétrico dirigido migração de moléculas carregadas no tanque de eletroforese. Tanque de electroforese podem ser divididos em categorias horizontais e verticais. Eletroforese de placa Vertical é uma forma mais comum, comumente usado em eletroforese em gel de poliacrilamida de separação das proteínas. Intermediário tanque de electroforese é apertado em conjunto, as duas folhas de vidro, placas de vidro separadas por uma tira em ambos os lados, no meio da placa de vidro preparada em electroforese em gel, o tamanho do gel é tipicamente 12 centímetros & amp; aguda; 14 cm, espessura de 1mm ~ 2 mm, nos últimos anos, tanque de eletroforese recém-desenvolvido, superfície de plástico é menor, mais fino, mais curtos reagentes eletroforese e salvar time.When você colocar cola em uma solução de gel pente de plástico, após a remoção da borracha a polimerização, a formação de uma ranhura na amostra. Electroforese horizontal, o que coloca em gel horizontal de vidro ou a placa de plástico, com uma fina camada de papel de filtro húmido e tampão de electroforese em gel de ligado, ou directamente imerso no tampão do gel. Porque mudando o pH de moléculas carregadas causar uma mudança na carga, o que afecta a sua velocidade de migração electroforética, de modo que o processo de electroforese para ser levada a cabo num tampão adequado, o tampão de carga pode manter estável propriedades de ser isolado.