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電気泳動法の基本原理

電気泳動法の基本原理

naky www.diecastingpartsupplier.com 2014-12-09 20:22:34
電気泳動

基本 電気泳動の原理

電気泳動は、荷電粒子が電界中を移動するプロセスを指す。アミノ酸、ペプチド、タンパク質、ヌクレオチド、核酸などを有するイオン化可能な基のような多くの重要な生物学的分子は、それらが正または負に帯電し、電界の作用下で、特定のpHで荷電することができる移動その分子をもたらした対向電極の帯電極性方向へ。電気泳動技術は、電界での使用であり、分子自体のサイズ、形状、および試料の帯電特性に分離される種々の分子の他の特性に起因する差は、帯電した分子は、異なる移動速度を有するため、サンプルは、単離され同定または技術を精製した。

電気泳動法 支持媒体中で行われなければならない。 Tiseliusら。 1937自由界面電気泳動分離の強い衝撃よりも固定支持媒体なので、拡散と対流を行わない。そのように、電気泳動の固定支持体が存在し、サンプルが干渉効果の拡散及び対流を減少させる、固定媒体中の電気泳動法に供した。最初の支持体は、現在、研究室でこれらのメディアが少なく塗布された紙、セルロースアセテート膜である。長期間にわたって、例えば、アミノ酸、ペプチド、糖などの小分子は、通常、セルロース濾紙、電気泳動分離媒体、分析用シリカゲル薄層プレートを使用して実施されるが、一般的にはより高感度の技術を使用しているHPLCなどと分析したような。これらの媒体は、小分子の分離に適した簡単、便利。しかし、あまり効果的で複雑な生体高分子を分離する。大幅に導入泳動技術の開発を推進し、支持体としてのゲルは、技術は、タンパク質、核酸および他の生体高分子の電気泳動分析の重要な手段となっている。ゲルは、最初に澱粉ゲルを用いたが、アガロースゲル及びポリアクリルアミドゲルで最も使用されている。ポリアクリルアミドゲル電気泳動の主要なを使用してタンパク質。

電気泳動装置は、2つの部分から構成され:電源と電気泳動槽。電気泳動槽内の荷電分子の移動を駆動する電界を発生させる直流電源、。電気泳動槽には、水平方向および垂直方向のカテゴリーに分けることができる。垂直板電気泳動は、一般的にタンパク質分離のポリアクリルアミドゲル電気泳動に使用されるより一般的な形態である。中間電気泳動槽を一緒にクランプされ、両側のストリップによって分離された2枚のガラス板、ガラス板は、ゲル電気泳動法で調製したガラス板の中央に、ゲルの大きさは、典型的には12センチメートル&#038である。急性。 14センチメートル、近年では1ミリメートル〜2ミリメートル、新たに開発された電気泳動槽、プラスチック表面の厚さが小さく、より薄く、より短い電気泳動試薬であり、あなたがプラスチック製のくし型ゲル溶液中に接着剤を置くtime.Whenゴムを除去した後、保存するには重合は、試料上の溝を形成する。水平電気泳動、ゲルは薄い湿った濾紙の層と接続され、ゲル電気泳動緩衝液を用いて、水平ガラスまたはプラスチック板上に敷設するか、直接ゲル緩衝液に浸した。荷電分子のpHを変化させることにより、その電気泳動速度に影響を与え、電荷の変化を引き起こすので、電気泳動法は、適当な緩衝液中で実施されるので、バッファは、単離物であることが、安定した帯電特性を維持することができる。