Le principe de base de l'électrophorèse
Naky
www.diecastingpartsupplier.com
2014-12-09 20:22:34
Électrophorèse
La base principe de l'électrophorèse
L'électrophorèse se réfère au processus de migrer les particules chargées dans un champ électrique. De nombreuses molécules biologiques importantes, telles que des acides aminés, des peptides, des protéines, des nucléotides, des acides nucléiques et ainsi ayant des groupes ionisables, ils peuvent être chargés positivement ou négativement à un pH spécifique, sous l'action du champ électrique, l'accusé introduit ses molécules se déplacent vers la direction opposée de polarité de charge de l'électrode. technique d'électrophorèse est l'utilisation dans le domaine électrique, la molécule elle-même et la différence due à la taille, la forme, et d'autres propriétés des différentes molécules à séparer dans les propriétés de charge de l'échantillon, les molécules chargées présentent des taux de migration, et donc les échantillons ont été isolés, identifiés ou technologie purifiés.
processus d'électrophorèse doit être effectuée dans un milieu de support. Tiselius et al. 1937 électrophorèse d'interface libre ne portait pas de moyen de support fixe, de sorte que la diffusion et la convection de la forte incidence de la séparation. Il existe donc un moyen de support fixe de l'électrophorèse, l'échantillon a été soumis à une procédé d'électrophorèse dans un milieu fixe, ce qui réduit la diffusion de l'effet d'interférence et par convection. Milieu de support initial est papier et acétate de cellulose membranes, actuellement ces médias dans le laboratoire a été appliqué moins. Pendant une longue période de temps, de petites molécules telles que des acides aminés, des peptides, des sucres ou analogues est habituellement effectuée en utilisant un papier filtre de cellulose, mince plaque de couche de gel de silice pour milieu de séparation électrophorétique, l'analyse, mais est généralement en utilisant des techniques plus sensibles telles que HPLC et similaires analysé. Ces supports adaptés pour la séparation de petites molécules, simples et pratiques. Mais pour la séparation de macromolécules biologiques complexes moins efficace. Gel en tant que milieu de support introduit grandement favorisé le développement de la technologie d'électrophorèse, la technologie est devenue un moyen important de l'analyse électrophorétique de protéines, acides nucléiques et d'autres macromolécules biologiques. Gel d'abord en utilisant du gel d'amidon, mais la plus utilisée gel d'agarose et gel de Polyacrylamide. Protéines en utilisant du gel de polyacrylamide majeure.
Appareil d'électrophorèse constitué de deux parties: La tension d'alimentation et la cuve d'électrophorèse. DC alimentation, générer un champ électrique entraîné la migration de molécules chargées dans le réservoir d'électrophorèse. cuve d'électrophorèse peut être divisé en catégories horizontales et verticales. Électrophorèse sur plaque verticale est une forme plus commune, couramment utilisé dans l'électrophorèse sur gel de Polyacrylamide de séparation des protéines. Cuve d'électrophorèse intermédiaire est serrée ensemble, les deux feuilles de verre, des plaques de verre séparées par une bande sur les deux côtés, au milieu de la plaque de verre préparée à l'électrophorèse sur gel, la taille du gel est typiquement de 12 cm & amp; aiguë; 14 cm, une épaisseur de 1mm ~ 2 mm, au cours des dernières années, le réservoir d'électrophorèse nouvellement développé, surface en plastique est plus petit, plus mince, des réactifs d'électrophorèse courts et d'économiser time.When vous mettez de la colle dans une solution de gel de peigne en plastique, après avoir enlevé le caoutchouc polymérisation, en formant une rainure sur l'échantillon. Électrophorèse horizontale, le gel de pose sur la vitre horizontal ou plaque en matière plastique, d'une mince couche de papier-filtre humide et le tampon d'électrophorèse sur gel est connecté, directement ou immergé dans le tampon de gel. Étant donné que la modification du pH de molécules chargées causer un changement de la charge, affectant ainsi sa vitesse de migration électrophorétique, de sorte que le processus d'électrophorèse devant être effectuée dans un tampon approprié, le tampon peut maintenir stable la charge propriétés d'être isolé.
La base principe de l'électrophorèse
L'électrophorèse se réfère au processus de migrer les particules chargées dans un champ électrique. De nombreuses molécules biologiques importantes, telles que des acides aminés, des peptides, des protéines, des nucléotides, des acides nucléiques et ainsi ayant des groupes ionisables, ils peuvent être chargés positivement ou négativement à un pH spécifique, sous l'action du champ électrique, l'accusé introduit ses molécules se déplacent vers la direction opposée de polarité de charge de l'électrode. technique d'électrophorèse est l'utilisation dans le domaine électrique, la molécule elle-même et la différence due à la taille, la forme, et d'autres propriétés des différentes molécules à séparer dans les propriétés de charge de l'échantillon, les molécules chargées présentent des taux de migration, et donc les échantillons ont été isolés, identifiés ou technologie purifiés.
processus d'électrophorèse doit être effectuée dans un milieu de support. Tiselius et al. 1937 électrophorèse d'interface libre ne portait pas de moyen de support fixe, de sorte que la diffusion et la convection de la forte incidence de la séparation. Il existe donc un moyen de support fixe de l'électrophorèse, l'échantillon a été soumis à une procédé d'électrophorèse dans un milieu fixe, ce qui réduit la diffusion de l'effet d'interférence et par convection. Milieu de support initial est papier et acétate de cellulose membranes, actuellement ces médias dans le laboratoire a été appliqué moins. Pendant une longue période de temps, de petites molécules telles que des acides aminés, des peptides, des sucres ou analogues est habituellement effectuée en utilisant un papier filtre de cellulose, mince plaque de couche de gel de silice pour milieu de séparation électrophorétique, l'analyse, mais est généralement en utilisant des techniques plus sensibles telles que HPLC et similaires analysé. Ces supports adaptés pour la séparation de petites molécules, simples et pratiques. Mais pour la séparation de macromolécules biologiques complexes moins efficace. Gel en tant que milieu de support introduit grandement favorisé le développement de la technologie d'électrophorèse, la technologie est devenue un moyen important de l'analyse électrophorétique de protéines, acides nucléiques et d'autres macromolécules biologiques. Gel d'abord en utilisant du gel d'amidon, mais la plus utilisée gel d'agarose et gel de Polyacrylamide. Protéines en utilisant du gel de polyacrylamide majeure.
Appareil d'électrophorèse constitué de deux parties: La tension d'alimentation et la cuve d'électrophorèse. DC alimentation, générer un champ électrique entraîné la migration de molécules chargées dans le réservoir d'électrophorèse. cuve d'électrophorèse peut être divisé en catégories horizontales et verticales. Électrophorèse sur plaque verticale est une forme plus commune, couramment utilisé dans l'électrophorèse sur gel de Polyacrylamide de séparation des protéines. Cuve d'électrophorèse intermédiaire est serrée ensemble, les deux feuilles de verre, des plaques de verre séparées par une bande sur les deux côtés, au milieu de la plaque de verre préparée à l'électrophorèse sur gel, la taille du gel est typiquement de 12 cm & amp; aiguë; 14 cm, une épaisseur de 1mm ~ 2 mm, au cours des dernières années, le réservoir d'électrophorèse nouvellement développé, surface en plastique est plus petit, plus mince, des réactifs d'électrophorèse courts et d'économiser time.When vous mettez de la colle dans une solution de gel de peigne en plastique, après avoir enlevé le caoutchouc polymérisation, en formant une rainure sur l'échantillon. Électrophorèse horizontale, le gel de pose sur la vitre horizontal ou plaque en matière plastique, d'une mince couche de papier-filtre humide et le tampon d'électrophorèse sur gel est connecté, directement ou immergé dans le tampon de gel. Étant donné que la modification du pH de molécules chargées causer un changement de la charge, affectant ainsi sa vitesse de migration électrophorétique, de sorte que le processus d'électrophorèse devant être effectuée dans un tampon approprié, le tampon peut maintenir stable la charge propriétés d'être isolé.