El principio básico de la electroforesis

La electroforesis

El básico principio de electroforesis

La electroforesis se refiere al proceso de las partículas cargadas migran en un campo eléctrico. Muchas moléculas biológicas importantes, tales como aminoácidos, péptidos, proteínas, nucleótidos, ácidos nucleicos y de modo que tienen grupos ionizables, pueden ser cargados positivamente o negativamente a un pH específico, bajo la acción del campo eléctrico, la cargada puesto sus moléculas se mueven hacia la dirección polaridad de carga electrodo opuesto. Técnica de electroforesis es el uso en el campo eléctrico, la propia molécula y la diferencia debido al tamaño, la forma y otras propiedades de las diversas moléculas a ser separadas en las propiedades de carga de la muestra, las moléculas cargadas tienen diferentes tasas de migración, y por lo tanto Se aislaron las muestras, identificadas o tecnología purificada.

Proceso de electroforesis debe llevarse a cabo en un medio de soporte. Tiselius et al. 1937 electroforesis interfaz libre llevó ningún medio fijo de apoyo, por lo que la difusión y la convección que el fuerte impacto de la separación. Así que hay un medio de soporte fijo de la electroforesis, la muestra se sometió a proceso de electroforesis en un medio fijo, reduciendo el efecto de interferencia de difusión y convección. Medio de soporte inicial es membranas de acetato de celulosa y de papel, en la actualidad estos medios en el laboratorio se ha aplicado menos. Durante un largo periodo de tiempo, pequeñas moléculas tales como aminoácidos, péptidos, azúcares o similares normalmente se lleva a cabo utilizando un papel de filtro de celulosa, gel de sílice placa de capa fina de medio de separación electroforética, análisis, pero en general se utilizan técnicas más sensibles tales como HPLC y similares analizado. Estos medios adecuados para la separación de moléculas pequeñas, simples y convenientes. Pero para la separación de macromoléculas biológicas complejas menos eficaz. Gel como un medio de soporte introducida en gran medida impulsado el desarrollo de la tecnología de la electroforesis, la tecnología se ha convertido en un importante medio de análisis de electroforesis de proteínas, ácidos nucleicos y otras macromoléculas biológicas. Gel inicialmente usando gel de almidón, pero más utilizado en gel de agarosa y gel de poliacrilamida. Proteínas utilizando electroforesis en gel de poliacrilamida importante.

Aparato de electroforesis consta de dos partes: La fuente de alimentación y el tanque de electroforesis. Fuente de alimentación DC, generando un campo impulsado la migración eléctrica de moléculas cargadas en el tanque de electroforesis. Tanque de electroforesis se puede dividir en categorías horizontales y verticales. Electroforesis en placa vertical es una forma más común, utilizado comúnmente en la electroforesis en gel de poliacrilamida de la separación de proteínas. Tanque de electroforesis intermedio se sujeta juntos, las dos hojas de vidrio, placas de vidrio separadas por una tira en ambos lados, en el centro de la placa de vidrio preparada en electroforesis en gel, el tamaño de gel es típicamente de 12 cm & amp; acute; 14 cm, un grosor de 1 mm ~ 2 mm, en los últimos años, el tanque de electroforesis de nuevo desarrollo, la superficie de plástico es más pequeño, más delgado, reactivos de electroforesis más cortos y para ahorrar tiempo en la que puso pegamento en una solución de gel peine de plástico, después de quitar la goma de polimerización, formando una ranura en la muestra. Horizontal electroforesis, el gel que pone en el vidrio horizontal o placa de plástico, con una fina capa de papel de filtro húmedo y el tampón de electroforesis en gel de conectado, o directamente sumergido en el tampón de gel. Debido a cambiar el pH de moléculas cargadas causar un cambio en la carga, afectando de este modo su velocidad de migración electroforética, por lo que el proceso de electroforesis se llevó a cabo en un tampón adecuado, el tampón puede mantener estable la carga propiedades de ser aislado.